天津大学研究出疫苗（天津大学研发出新冠病毒口服疫苗）

网传消息：天津大学黄金海教授团队宣布已成功研发出新型冠状病毒口服疫苗，黄金海教授本人已经4倍量口服新冠疫苗样品，无任何副反应。榆树网

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鉴定结果：尚无定论

权威解读：

• 利用酵母展示体系进行疫苗研究是一个比较成熟的体系，在兽用疫苗研究中很受重视。
• 目前天津大学的研究是一个很初步的结果，只是完成的疫苗设计和小量制备，还没开始动物实验，没有基础的数据，很难说有没有用。

查证者：病原生物学博士 Vigorous Cooler

延伸阅读：

本文约3000字，阅读时间大约8分，需要一定分子生物学基础理论知识背景（高中生物）。

关键信息有这么几条——

【1】酵母体系；

【2】外源抗原为：S蛋白保护性抗原RBD-FP域；

【3】动物毒理学、免疫效力还没开始。

【1】酵母体系

酵母我们大家都不陌生，从家里发面到啤酒生产，都离不开酵母。所以，酵母本身是一个比较安全的载体..是毋庸置疑的。新闻中黄教授用的也是食品级酵母作为载体的。

那如何用酵母来表达外源基因呢？

对了新闻里面把病毒的名称用错了，WHO的名称COVID-19是疾病名，而不是病毒名。

新闻里提到“表面展示，分泌等系列稳定表达载体”。

也就是 1）表面展示和 2）分泌，其实非常好理解，就是字面意思：

1. 表面展示就是酵母的外表面镶嵌了表达的外源蛋白；
2. 分泌表达就是酵母把表达的外源蛋白通过“胞吐”等方式“吐”了出来，这是一种游离形式。

【2】保护性抗原

对于疫苗制备来说，如果是分泌表达，其实我们大家也不陌生。我们现在使用的乙型肝炎的疫苗，主要抗原成分也就是乙肝表面抗原（HBsAg），默沙东公司的四价和九价HPV疫苗，这两者都是使用的酿酒酵母表达出来的蛋白抗原。所以，分泌表达形式的酵母一般是作为比较纯的抗原疫苗生产载体的，一般不会直接把酵母作为抗原直接吞掉。

那么显而易见，新闻中黄教授使用的就是表面展示的酵母表达体系了。

厘清这一点，我们来详细看一下表面展示型的酵母表达体系。

首先是这类研究并不少，国内外都有：

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• 基于酿酒酵母表面展示技术构建寨卡口服疫苗及其免疫活性初探[J].中国医药导刊, 2018, 20(04):228-234.
• 重组狂犬病病毒糖蛋白活酵母疫苗经小鼠口服给药后的免疫效果[J].中国生物工程杂志, 2014, 34(01):9-14.
• Baker's yeast expressing the Japanese encephalitis virus envelope protein on its cell surface: induction of an antigen-specific but non-neutralizing antibody response. Yeast. 2009 Jul;26(7):383-97. （烘焙酵母展示表达..脑炎病毒E蛋白，诱导抗原特异性但非中和抗体应答）
• Cell surface display of highly pathogenic avian influenza virus hemagglutinin on the surface of Pichia pastoris cells using alpha-agglutinin for production of oral vaccines. Biotechnol Prog. 2010 Mar-Apr;26(2):542-7.（利用α-凝集素在毕赤酵母表面表达高致病型禽流感病毒血凝素以生产口服疫苗）
• Gene delivery to dendritic cells by orally administered recombinant Saccharomyces cerevisiae in mice. Vaccine. 2013 Feb 27;31(10):1360-3. （口服重组酿酒酵母在小鼠中将基因导入树突状细胞）
• Expression and characterization of an M cell-specific ligand-fused dengue virus tetravalent epitope using Saccharomyces cerevisiae. J Biosci Bioeng. 2015 Jan;119(1):19-27. （在酿酒酵母中表达验证M细胞特异性的配体融合的四价登革病毒抗原）
• Human Enterovirus 71 Protein Displayed on the Surface of Saccharomyces cerevisiae as an Oral Vaccine. Viral Immunol.2016 Jun;29(5):288-95.（人肠道病毒71型蛋白展示表达于酿酒酵母表面的口服疫苗）
• Oral vaccination of mice with Tremella fuciformis yeast-like conidium cells expressing HBsAg. Biotechnol Lett. 2015 Mar;37(3):539-44. （银耳表达乙肝病毒表面抗原口服途径免疫小鼠）

这种方式好像在兽用疫苗中比较受重视，光综述就有不少，文献中给猪、给鱼的研究比较多。

1. Edible vaccines against veterinary parasitic diseases--current status and future prospects. Vaccine. 2013 Apr 8;31(15):1879-85. （可服疫苗预防兽寄生虫病——当前进展与未来预期）
2. Animal vaccines based on orally presented yeast recombinants. Vaccine. 2013 Sep 13;31(40):4287-92. （基于口服重组酵母的动物疫苗）

黄教授之前也有一篇利用酵母表达的针对猪圆环病毒病毒样颗粒的文章。

再来看新闻里的研究——

稳定表达COVID-19病毒S蛋白保护性抗原RBD-FP域疫苗菌株

我们知道对于新型冠状病毒（2019-nCoV或SARS-CoV2）来说，病毒外表面是刺突蛋白S，S通过结合受体ACE2介导病毒的基因组进入细胞，从而产生子代病毒。

所以，如果将S蛋白结合ACE2这个过程阻断，那么就可以阻断病毒进入细胞，从而达到保护的效果。

疫苗的策略就是利用各种手段将S蛋白导入人体，同时又不会像病毒感染那样造成严重后果。所以，对于新型冠状病毒来说，S蛋白就是一种保护性抗原。

这条新闻里面的策略就是用的病毒S蛋白保护性抗原RBD-FP域。

这里面有一个名词，RBD-FP域。RBD不需要多介绍了，受体结合结构域，也就是S蛋白中专门跟ACE2结合的那一部分氨基酸，那么FP是啥？

没猜错的话，FP是fusion peptide的缩写，也就是融合肽。

S蛋白结合ACE2之后并不会马上让病毒的包膜与细胞膜发生融合，而是有一个“扳机”的过程，这个扳机就是FP；FP主要是几个具有疏水性R基团的氨基酸（比如苯环、烷烃这样的结构）这些R基团可以插入全部是磷脂双分子的细胞膜中，从而诱导病毒包膜与细胞膜的融合。

这一部分我们要知道的就是，黄教授的酵母里有新冠病毒的S-RBD-FP，这是一种保护性抗原。

【3】疫苗评价

这是这个新闻最“标题党”的部分了。

一个疫苗从设计到上市是一个漫长的过程，新闻里也提到了。

那到底有多长呢？

临床前的研究包括疫苗原理设计与小量制备，并在动物模型上进行免疫学效果的评价（比如诱导抗体的能力，诱导杀伤性T细胞的效力，细胞分子的分泌水平等等），并且很关键的一条是进行动物保护实验 ，也就是疫苗免疫后跟对照组相比，能不能使得动物在活病毒的攻击下存活？

只有这些都完成了，才能说“嗯，这个疫苗可能有用”，这时候才是准备材料，申请进入临床。

临床的I期和II期都是看这个疫苗安全不安全，另外再做做免疫学的指标评价，III期才是看疫苗在人群中有没有保护效果，这个志愿者规模会大一点。之后才是制证上市。

而新闻里面也提到了——

黄金海教授本人已经4倍量口服新冠疫苗样品，无任何副反应。

目前团队正在积极布置进行动物毒理学、免疫效力、中试生产等评价。

也就是说，这个原理设计的疫苗可能只是安全，到底能不能诱导机体产生抗体？有没有保护作用都是未知数。

可能安全，但有效性未经验证！

本文到此讲解完毕了，希望对大家有帮助。